单克隆抗体细胞培养发酵工艺流程

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单克隆抗体细胞培养发酵工艺流程

单克隆抗体细胞培养发酵,是生产引入基因工程中的抗体的一种方法。它包括向宿主细胞添加基因,通过对宿主细胞进行培养发酵,并将其热伤死,以获取抗体。根据对目标抗体分子结构和特异性要求,在培养发酵工艺中调整不同的设定参数,以实现不同数量、质量和特异性的抗体生产。下面介绍单克隆抗体细胞培养发酵的流程。

第一步,人工构建转移载体。这一步通常包括细胞表达载体外源基因的设计、组装和建构,特别是参考非天然抗体基因结构,组装外源载体,产生重组蛋白质表达载体,同时还需根据实验特点,评估载体基因组的质量,确保质量达标。

第二步,细胞转染。一般采用质粒转染、转染法等方法,将重组质粒导入目的宿主细胞,形成表达的细胞群体,表达重组或克隆抗体。

第三步,细胞发酵培养。发酵过程中,主要包括对细胞培养基中的温度、湿度、pH等环境因子的调节,细胞的增殖程度调控较容易,抑制细菌生长,提高了细胞的生长和增殖速率,同时也能够改善抗体的表达量和细胞的产量。

第四步,抗体产品热伤死。获得抗体产品后,进行热伤死处理,以杀灭宿主细胞及形成细菌污染物质,同时保护抗体产品不受影响,产品热伤死后,就可以进行下一步的纯化处理,评估抗体的生物活性和功能。

以上就是单克隆抗体细胞培养发酵的流程。单克隆抗体细胞培养发酵生产引入基因工程中的抗体,生产效率较高,抗体质量稳定,能够较好地满足特异性要求。

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