微生物技术及应用专业——质粒DNA小量提取试剂盒说明书

日期: 栏目:生物技术 阅读:0
微生物技术及应用专业——质粒DNA小量提取试剂盒说明书

导言

微生物技术及应用专业是一门新兴的交叉学科,涉及微生物学、分子生物学、遗传学、生物化学等多学科的知识和技术质粒DNA小量提取试剂盒是该领域必备的工具之一,可用于从细菌、酵母等微生物中快速、高效地提取质粒DNA。本说明书旨在指导用户正确使用本试剂盒,获得高质量的质粒DNA。

试剂盒组成

本试剂盒包含以下组分:

裂解缓冲液:含有碱变性剂和蛋白酶K,用于裂解细菌细胞和降解蛋白质。

中和缓冲液:含有乙酸钾,用于中和裂解缓冲液,沉淀细胞碎片和蛋白质。

洗涤缓冲液:含有乙醇,用于洗涤质粒DNA,去除杂质。

洗脱缓冲液:含有低离子强度的缓冲液,用于洗脱质粒DNA。

RNase A:用于降解提取过程中可能存在的RNA,避免RNA污染。

试剂盒特点

本试剂盒具有以下特点:

快速高效:整个提取过程可在30分钟内完成,操作简单,无需复杂设备。

高纯度:提取的质粒DNA纯度高,可直接用于后续实验,如PCR、测序、转化等。

高产量:从1-5 mL细菌培养物中,可提取10-50 μg质粒DNA,满足不同实验需求。

广泛适用:适用于各种革兰氏阴性和阳性细菌、酵母等微生物,可提取不同大小的质粒DNA。

操作步骤

1. 细胞裂解

收集1-5 mL细菌培养物,离心收集细胞。

重悬细胞于250 μL裂解缓冲液中,充分混匀。

加入10 μL RNase A,混匀。

于55℃孵育10分钟,间歇震荡。

2. 中和

加入250 μL中和缓冲液,充分混匀。

离心13000 rpm,10分钟,4℃。

取上清液至新的离心管中。

3. 洗涤

加入500 μL洗涤缓冲液,充分混匀。

离心13000 rpm,10分钟,4℃。

小心吸去上清液,不要触及沉淀。

重复洗涤步骤。

4. 洗脱

加入50-100 μL洗脱缓冲液,混匀。

于55℃孵育5分钟。

离心13000 rpm,1分钟。

小心吸取上清液,即为提取的质粒DNA。

注意事项

裂解缓冲液和中和缓冲液为腐蚀性,操作时请佩戴手套和护目镜。

使用过程中请严格按照说明书操作,避免污染和交叉污染。

提取的质粒DNA可于-20℃长期保存。

标签: